紫外分光光度計就是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。紫外分光光度計可以在紫外可見光區(qū)任意選擇不同波長的光。物質(zhì)的吸收光譜就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量，相應(yīng)地發(fā)生了分子振動能級躍遷和電子能級躍遷的結(jié)果。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子 、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu)，其吸收光能量的情況也就不會相同，因此，每種物質(zhì)就有其*的、固定的吸收光譜曲線，可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質(zhì)的含量。
一、紫外分光光度計的光度重復(fù)性
紫外可見分光光度計國家計量檢定規(guī)程規(guī)定, 光度重復(fù)性要測試3 次, 取3 次中的較大較小之差作為光度重復(fù)性。光度重復(fù)性的測試方法是選定一個標(biāo)準(zhǔn)樣品, 由同一個操作者,進(jìn)行3～5 次測試, 再計算光度重復(fù)性。具體操作方法為: 儀器冷態(tài)開機(jī), 預(yù)熱0. 5h 后, 對標(biāo)準(zhǔn)樣品或使用者自選的樣品進(jìn)行光譜掃描, 而后在譜圖上選擇幾個特征吸收峰, 檢查在選定的測量次數(shù)內(nèi), 各個峰值的之差即為光度重復(fù)性。人們經(jīng)常將光度準(zhǔn)確度和光度重復(fù)性在一次操作中完成。
儀器穩(wěn)定可靠, 其中很重要的一點就是光度重復(fù)性好?？梢栽O(shè)想: 一臺紫外可見分光光度計, 它的功能很強大、自動化程度很高、外形美觀、價格合理, 但它測出的數(shù)據(jù)不能重復(fù), 那肯定不是好儀器。
二、影響光度重復(fù)性的主要因素
影響紫外可見分光光度計光度重復(fù)性的主要因素有以下幾種。
1.光源系統(tǒng)
光源系統(tǒng)即指燈泡和電源。如果氘燈或鎢燈燈泡本身的質(zhì)量不好, 即使電源很好, 氘燈或鎢燈發(fā)出的光通量肯定不穩(wěn)。這樣, 紫外可見分光光度計就不可能得到好的、穩(wěn)定的測試結(jié)果。如果氘燈或鎢燈的燈泡很好, 但其電源不穩(wěn), 那么光源系統(tǒng)(燈泡) 發(fā)出的光通量也不可能穩(wěn), 也不可能得到好的光度重復(fù)性。
2.光電轉(zhuǎn)換器系統(tǒng)
光電轉(zhuǎn)換器系統(tǒng)包括光電轉(zhuǎn)換元件及其供電電源; 光電轉(zhuǎn)換元件是將光信號轉(zhuǎn)換成電信號的關(guān)鍵元件。不管紫外可見分光光度計的其他元部件 多好, 如果光電轉(zhuǎn)換元件不好, 就不可能得到好的光度重復(fù)性。
3.如果光電轉(zhuǎn)換元件很好, 其供電電源不好, 電源一直在波動或漂移, 也不可能得到好的光度重復(fù)性。因此, 紫外可見分光光度計的制造者和使用者一定要高度重視光電轉(zhuǎn)換器系統(tǒng)對光度重復(fù)性的影響。
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